收藏本站
《中国科学院大学(中国科学院武汉病毒研究所)》 2019年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

流行性乙型脑炎病毒的高内涵抗病毒药物筛选

张哲瑞  
【摘要】:流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是虫媒病毒的重要成员,属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus),是流行性乙型脑炎的致病原。JEV主要流行于亚洲太平洋地区,影响人口高达30亿。虽然疫苗的使用大大降低了流行性乙型脑炎的发病率,全球每年仍有67000例乙型脑炎发生。该病致死率高达30%,且多数幸存者会伴随有严重的神经性疾病,对人们的生命及健康造成了重大的威胁。目前而言,临床上仍然没有能够治疗该病症的药物及特殊的治疗方法。因此对于抗病毒药物的筛选及研发显得尤为重要。报告病毒是指带有报告基因标记的病毒粒子,通过报告基因的表达来反映病毒在机体内的复制及扩散情况。报告病毒具有完整的感染性病毒粒子,与野生型病毒具有相似的理化性质,因此可用于筛选针对病毒整个生命周期的抗病毒药物。病毒的生长情况可以通过检测报告基因的表达水平而反映,因此与传统的方法相比更加方便、快捷。此外报告病毒还可用于活体成像观察病毒在小鼠体内的生长及扩散情况,对于研究病毒的致病机制、药物的评价等方面具有重要的作用。本研究中,我们通过融合PCR的方法将eGFP基因插入到病毒基因组的5’UTR及Capsid之间,构建成基因组带有eGFP标记的JEV-eGFP报告病毒的全长感染性克隆。将其体外转录的RNA转染入敏感细胞后成功拯救出能够在细胞中复制和扩散的JEV-eGFP报告病毒。对JEV-eGFP的生长特性及稳定性进行研究发现,该报告病毒的生长趋势基本上与野生型类似,能够在细胞中稳定传4代。药物抑制实验结果表明,JEV-eGFP报告病毒与JEV-WT的药物抑制曲线类似,EC_(50)相近。证明JEV-eGFP报告病毒能够用于抗病毒药物筛选且能够通过观察eGFP的荧光强度及表达eGFP的阳性细胞数的变化来表征药物对病毒的抑制效果。为建立针对病毒整个生命周期药物的高通量筛选方法,我们利用JEV-eGFP构建了高内涵抗病毒药物筛选平台,并对FDA批准的药物库进行了抗JEV病毒的高内涵筛选。该药物库含有1443种抗病毒化合物,均已是能够在临床上使用的药物,如果筛选出可用的药物能够大大缩短新药研发到临床的时间和金钱。通过初次筛选及再次验证,我们共从FDA药物库1443种化合物中筛选出一些对JEV有潜在抑制的药物。其中有6种药物已被相关研究证明对野生型病毒有潜在的抗病毒效果。进一步证明了我们构建的筛选系统的可靠性。对另外新发现的几种药物的抗病毒效果进行评价,发现均可对JEV病毒产生明显抑制,表现出较好的抗病毒效果。以上结果证明了我们所构建的报告病毒及高内涵抗病毒药物筛选平台能够很好的应用于JEV的抗病毒药物筛选。对于药物的筛选及后续的研究具有重要的作用。
【学位授予单位】:中国科学院大学(中国科学院武汉病毒研究所)
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R978.7

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王孝利;;抗病毒药物在猪病防控中的应用[J];畜牧兽医科技信息;2019年06期
2 彭海燕;王春燕;;抗病毒治疗对儿童传染性单核细胞增多症的效果分析[J];中外医学研究;2018年02期
3 邸晓丽;;跟踪护理对乙型肝炎后肝硬化患者抗病毒药物治疗的依从性影响分析[J];中国医药指南;2017年01期
4 刘鹏英;;直接抗病毒药物治疗慢性丙型肝炎患者的研究进展[J];医疗装备;2017年12期
5 康医生;;什么是艾滋病“发现即治疗”新标准?[J];健康生活;2016年12期
6 高花兰;;乙肝患者服用抗病毒药莫随意[J];中南药学(用药与健康);2016年09期
7 何榆梅;;肺结核合并乙型肝炎病毒感染患者抗病毒与护肝治疗的疗效分析[J];健康之路;2016年08期
8 闫杰;;男性乙肝病人抗病毒治疗会影响生育吗[J];健康博览;2017年03期
9 陈秀英;黄耀广;;艾滋病抗病毒药物不良反应分析[J];人人健康;2017年06期
10 王肖鹏;;优化护理对妊娠合并乙肝患者抗病毒过程中的影响[J];家庭医药.就医选药;2017年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周德敏;;基于病毒与宿主细胞识别调控的新型抗病毒药物研究[A];2015年中国药学大会暨第十五届中国药师周报告集[C];2015年
2 蔡步林;李卓荣;;抗病毒药物的研究开发策略[A];2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2006年
3 陈本川;;抗病毒药物的现状及研究进展[A];二○○三年全国医药工业技术工作年会专题报告汇编[C];2003年
4 岑山;;新型抗病毒药物的研究策略[A];第二届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会论文摘要集[C];2010年
5 郑珩;吴梧桐;;抗病毒药物筛选使用的酶靶标[A];第四届中国酶工程学术交流讨论会论文集[C];2003年
6 高峰;;扶正化瘀胶囊联合核苷(酸)类抗病毒药物对乙型肝炎肝硬化的疗效观察[A];全国第2届中西医结合传染病学术会议暨国家中医药管理局第1届传染病协作组会议论文汇编[C];2008年
7 张鸿飞;;儿童慢性乙型肝炎抗病毒治疗有关问题[A];第九届全国疑难及重症肝病大会论文集[C];2017年
8 王玉如;;抗病毒药物在皮肤科的应用[A];第七次全国中西医结合变态反应学术会议、辽宁省首届中西医结合变态反应学术会议、沈阳军区首届免疫学及变态反应学术会议论文汇编[C];2015年
9 王玉如;;抗病毒药物在皮肤科的应用[A];2015全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编[C];2015年
10 蒋莹莹;卞丹丹;周海洋;段淑丽;王钊;刘霜;刘梅;陈煜;郑素军;段钟平;;中国大陆医生抗丙型肝炎病毒治疗现状调查[A];第九届全国疑难及重症肝病大会论文集[C];2017年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 辽宁 主任医师 王振坤;乙肝难治 症结在哪[N];家庭医生报;2017年
2 本报记者 燕声;乙肝妈妈完全可以生出健康宝宝[N];保健时报;2017年
3 北京地坛医院肝病中心主任医师 闫杰 整理 王燕;乙肝,不该治时别惹它[N];健康报;2017年
4 记者 张佳星;干扰素抗病毒可以更“铁腕”[N];科技日报;2017年
5 本报记者 吴苡婷;在没有硝烟的抗病毒战场上奋力前行[N];上海科技报;2017年
6 记者 魏东柱;把艾滋病防治工作实事做实好事做好[N];开封日报;2009年
7 上海长海医院教授 万漠彬;乙肝抗病毒治疗前六个月是关键期[N];健康时报;2009年
8 刘士敬;治疗乙肝洋药“水土不服”[N];中国医药报;2000年
9 黄美裕 胡波;抗病毒药物全面脱销[N];中国医药报;2003年
10 吴月树 高晓宁 田春林;严防抗病毒药染上“病毒”[N];中国医药报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 代文文;肠道病毒71型及单纯性疱疹病毒2型的抗病毒药物的作用研究[D];吉林大学;2018年
2 熊炜;干扰素诱导的MyD88蛋白抑制乙型肝炎病毒复制的研究[D];复旦大学;2004年
3 包木胜;新型CpG ODN大规模筛选及其抗病毒作用的研究[D];吉林大学;2005年
4 郑毅春;中药抗病毒胶囊对RGH患者生存质量的影响及抗HSV-2潜伏感染的实验研究[D];广州中医药大学;2006年
5 贾红伟;链霉菌1948发酵液中抗病毒活性成分的提取分离、结构测定及抗病毒作用的研究[D];中国协和医科大学;1998年
6 李红毅;中药抗病毒胶囊对RGH患者TLR9及对小鼠HSV-2感染TLR9、IFNα影响[D];广州中医药大学;2008年
7 张晴霞;几类流行病模型研究[D];电子科技大学;2015年
8 刘志荣;16年间住院慢性HBV感染患者抗病毒治疗及停药队列复发后的临床特点[D];山东大学;2017年
9 刘飞;基于分子识别的新型抗病毒仿生纳米材料的基础研究[D];华中科技大学;2015年
10 谢达菲;基于关联网络的宿主靶向抗病毒药物重定位研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2015年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨俊;吸毒对HIV-1抗病毒治疗耐药影响的回顾性队列研究[D];广西医科大学;2019年
2 张哲瑞;流行性乙型脑炎病毒的高内涵抗病毒药物筛选[D];中国科学院大学(中国科学院武汉病毒研究所);2019年
3 韩连秀;抗病毒治疗乙肝合并肾损害的临床分析[D];皖南医学院;2018年
4 余燕云;艾滋病抗病毒治疗者高血压患病及影响因素研究[D];昆明医科大学;2018年
5 许佳莉;凉山州艾滋病疫情重点县成人抗病毒治疗效果及影响因素分析[D];中国疾病预防控制中心;2018年
6 文湖钧;PLWHA接受与维持艾滋病抗病毒治疗的现状及其影响因素研究[D];天津医科大学;2018年
7 丁杰雯;西藏地区乙肝相关性肝癌TACE术联合抗病毒治疗疗效及安全性评价[D];西藏大学;2018年
8 陈美玲;中国不同性别成人艾滋病抗病毒治疗效果的差异[D];中国疾病预防控制中心;2017年
9 杨振鹏;抗病毒治疗可改善复发性肝细胞癌病人RFA后的总体生存[D];青岛大学;2018年
10 李亚;淮北市艾滋病感染者及病人抗病毒治疗效果研究[D];安徽医科大学;2016年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026


日本高清免费一本视频,一本道久在线88综合,日本一本道手机在线dvd,东京热一本道色综合网,一本首久久综合久久爱,